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原标题:华南植物园“一种特异性重组酶系统

作者:admin     发布时间:2020-01-11 02:50 点击数:
原标题:华南植物园“一种异性重组酶系统及其应用”获发明专利此前中科院华南植物园区永祥研究员所带领的团队建立了一套由重组酶介导的基因定点叠加系统以提高多基因分子育种的效率(Hou et al. 2014 Molecular plant 7: 1756- 1765)在这套系统中Cre重组酶扮演着重要的角色??在每一轮的基因叠加后删除不再需要的外源DNA片段(例如抗性标记和载体骨架等)以提高转基因作物的生物安全性并方便下一轮基因叠加工作的进行传统上人们可以将转基因的目标植株与表达Cre的植株杂交快速地向目标植株导入Cre酶使目标基因组能按计划地将位于2个 lox之间的非必需DNA删除然而维持具有高活性的Cre植物系是非常困难的(高表达Cre酶很可能会对寄主产生毒害作用)所以若用这种方法进行基因删除其效率难以得到保证 为此区永祥研究员与博士生玛丽安希望将Cre拆分为两个没有活性的部分:一部分的编码基因在构建目标植株时带入另一部分则独立转入另外一个植株中然后将这些植株进行杂交使Cre的这两部分同时导入到目标植株中并重新组合以恢复Cre的活性进而完成删除工作虽然目前已有研究报道了适合拆分Cre的位点但是这些方法都受到了专利的保护无法自由使用所以需要寻找新的位点经过大量测试后他们最终在Cre的蛋白序列中找到了一个适合拆分Cre的新位点(位于Lys244 和Asn245之间)令人惊喜的是在植物中细胞中由这两部分重新组合的Cre的活性与野生型Cre的活性相近 此结果很好的证明了这项基因删除技术在植物中的可应用性该方法的建立将有助于推进多基因定点聚合分子育种的进程具有非常广阔的应用前景相关专利于2019年获得了国家知识产权局的授权 专利证书
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